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ELISA試劑盒原抗體結(jié)合的合適溫度
更新時(shí)間:2016-08-25   點(diǎn)擊次數(shù):1222次

   因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA試劑盒反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。ELISA試劑盒屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),這是一個(gè)逐步平衡的過程,ELISA試劑盒只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。
  溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗。在建立ELISA試劑盒方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí),產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng),在ELISA試劑盒中一般不予采用。

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