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ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法簡(jiǎn)述
更新時(shí)間:2014-09-25   點(diǎn)擊次數(shù):2466次

ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法簡(jiǎn)述:
1)間接法測(cè)抗體:將特異性抗原包被在固相載體上,形成固相抗原,加入待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗體),其中抗體與固相抗原形成抗原-抗體復(fù)合物,再加入酶標(biāo)記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體,亦稱二抗),與上述抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。此時(shí)加入底物,復(fù)合物上的酶則催化底物而顯色。
雙抗體夾心法測(cè)抗原:將已知的特異性抗體包被在固相載體上,形成固相抗體,加入待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗原),抗原與固相抗體結(jié)合成復(fù)合物,再加入特異性酶標(biāo)抗體,使之與已形成的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合,當(dāng)加入與酶相應(yīng)的底物時(shí),酶催化底而顯色,根據(jù)顏色的有無(wú)和顏色的深淺對(duì)待測(cè)抗原進(jìn)行定性和定量。
ELISA檢測(cè)試劑盒競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原將特異性抗體與固相聯(lián)結(jié),形成固相抗體,加入待測(cè)標(biāo)本(含相應(yīng)抗原)和相應(yīng)的一定量的酶標(biāo)抗原,待測(cè)標(biāo)本中的抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,待測(cè)標(biāo)本中抗原含量越高,則與固相抗體結(jié)合亦越多,使得酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合的機(jī)會(huì)就越少,甚至沒(méi)有機(jī)會(huì)結(jié)合。加入底物后不顯色或顯色很淺,顯色深者為陰性。
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)的量反應(yīng)分析:
不同的酶聯(lián)免疫方法檢測(cè)結(jié)果的OD值均與標(biāo)本中待檢的抗原或抗體的量相關(guān)(間接法和夾心法正相關(guān),競(jìng)爭(zhēng)法負(fù)相關(guān)),因此可以利用OD值對(duì)標(biāo)本中的待檢物質(zhì)進(jìn)行定量分析。
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)質(zhì)反應(yīng)分析:ELISA檢測(cè)試劑盒根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本OD值,對(duì)標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)做出有或無(wú)的判定(即陽(yáng)性反應(yīng)或陰性反應(yīng))

 

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